在细胞实验中,活率计数是评估细胞状态的核心指标,台盼蓝染色与 AOPI 荧光染色作为主流方法,常让研究者在选择时陷入权衡。事实上,二者并无绝对优劣,仅存在场景适配差异 ——博大博聚-全自动细胞计数仪,正是能精准支撑两种需求的全能工具。
台盼蓝染色作为沿用数十年的经典方法,凭借操作便捷、成本可控的优势,至今仍是基础实验室的首选。其原理是利用活细胞完整的细胞膜对染料的排斥作用:活细胞不被染色,死细胞因细胞膜破损被染成蓝色,整个染色-计数流程可在几分钟内完成。对于常规细胞传代、教学实验等对效率要求高的场景,这种“即染即测”的特性尤为实用。
但台盼蓝染色的局限性也需正视:
① 时效性严格:染色后需在10分钟内完成检测。这是因为活细胞对台盼蓝的排斥是暂时的——长时间暴露于染料中,台盼蓝的细胞毒性会逐渐破坏活细胞膜完整性,导致原本存活的细胞被染色,最终使活率检测值偏低。在高通量实验中,若批量样本处理间隔过长,极易出现前后数据偏差。
②-复杂样本适应性弱:对于直径较小的细胞(如外周血单个核细胞,PBMC)或含大量杂质的样本,台盼蓝的明场检测模式易受干扰。由于杂质与细胞在形态、颜色上区分度低,显微镜下难以精准识别,可能导致漏计(误将小细胞当作杂质)或错计(误将杂质当作细胞)。
此时,AOPI 荧光染色的优势便凸显出来。AOPI荧光染色通过两种核酸染料的协同作用实现精准区分:吖啶橙(AO)可穿透所有细胞膜,与活细胞、死细胞的核酸结合,在488nm 激发光下发出绿色荧光;碘化丙啶(PI)同样能与核酸结合,但仅能通过破损的细胞膜进入死细胞,在535nm激发光下发出红色荧光——最终呈现 “活细胞绿、死细胞红” 的清晰信号。
博大博聚-全自动细胞计数仪搭载明场+双色荧光通道:明场通道适配台盼蓝染色,双色荧光通道:488nm 激发 / 525nm 发射通道捕捉 AO 绿色信号,535nm 激发 / 610nm 发射通道识别 PI 红色信号,即使是早期凋亡(细胞膜轻微破损)的细胞也能被精准判定。更重要的是,荧光信号的特异性让 AOPI 对复杂样本的耐受性远超台盼蓝:处理含大量细胞碎片、血清颗粒的样本时,杂质不会产生荧光信号,不干扰计数;
当然,AOPI 荧光染色也有需注意的短板:
① 成本较高:AOPI荧光染料成本显著高于台盼蓝染料;
② 操作要求更严:荧光染料易受强光淬灭,需避光操作(染色后、检测前需避免直射光),否则可能因信号衰减导致计数偏差。
因此,在基础实验、学生训练等对成本敏感且样本简单的场景,台盼蓝仍是性价比之选;而在生物制药(如 CAR-T 细胞制备)、复杂样本分析(如 PBMC 活性检测)等对精度要求严苛的场景,AOPI 显然更具优势。
博大博聚-全自动细胞计数仪通过模块化设计实现 “一键切换”:台盼蓝染色模式支持高通量快速计数,AOPI荧光染色模式搭载 AI 智能算法(可自动识别细胞与杂质、拆分聚团细胞),兼顾效率与精度。无论你是高校实验室的教学研究者,还是生物制药企业的GMP级质控人员,都能找到适配方案。
选择哪种染色?答案藏在你的实验需求里。而博大博聚-全自动细胞计数仪,始终是那个懂你所需的可靠伙伴,让每一次活率计数都精准高效。